本公開涉及結(jié)合pdl1的抗體和抗體衍生物及其使用方法。在某些實(shí)施方案中，該抗體衍生物是結(jié)合pdl1和另外的抗原(例如vegf)的多特異性抗體。

背景技術(shù)：

1、pdl1(也稱為cd274)是免疫抑制性受體配體，其由免疫細(xì)胞和各種類型的腫瘤細(xì)胞表達(dá)。該配體與其受體pd1的相互作用抑制了t細(xì)胞活化和細(xì)胞因子分泌。在腫瘤微環(huán)境中，這種相互作用可通過細(xì)胞毒性t細(xì)胞失活為腫瘤細(xì)胞提供免疫逃避，并且抑制pd1/pdl1相互作用可在臨床前模型中介導(dǎo)有效的抗腫瘤活性。盡管使用pd1/pdl1相互作用的抗體抑制劑治療癌癥已進(jìn)入臨床試驗(yàn)，但本領(lǐng)域仍需要開發(fā)用于治療癌癥的靶向pdl1的分子和方法。

2、vegf(也稱為vegfa、mvcd1、vpf和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子a)是pdgf/vegf生長(zhǎng)因子家族的成員。已知vegf誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，這對(duì)于生理學(xué)和病理學(xué)血管生成都至關(guān)重要。vegf在許多已知腫瘤中呈上調(diào)表達(dá)，并且是許多正在開發(fā)的癌癥治療中的靶標(biāo)。因此，本領(lǐng)域需要開發(fā)靶向vegf的治療分子和方法以用于癌癥治療。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本公開提供了以高親和力特異性結(jié)合pdl1的分離的單克隆抗體和抗體衍生物，包括單特異性抗pdl1抗體以及結(jié)合pdl1和一種或多種另外的靶標(biāo)的多特異性抗體。在某些實(shí)施方案中，該一種或多種另外的靶標(biāo)是vegf。在某些實(shí)施方案中，本文公開的抗體或抗體衍生物包括結(jié)合pdl1的單結(jié)構(gòu)域抗體。本公開還提供了本文公開的抗體和抗體衍生物以及包含其的藥物組合物的制備和使用方法，例如用于治療疾病和病癥，例如癌癥。本發(fā)明部分地基于以下發(fā)現(xiàn)：結(jié)合pdl1的新型單結(jié)構(gòu)域抗體、具有降低的與紅細(xì)胞結(jié)合的新型抗vegf抗體以及結(jié)合pdl1和vegf的新型多特異性抗體，這些抗體中的每一者都能夠靶向腫瘤細(xì)胞并且/或者增加針對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答，從而提供改善的抗腫瘤功效。

2、本公開提供了一種結(jié)合pdl1和vegf的多特異性抗體，該多特異性抗體包含：i)第一抗原結(jié)合部分，該第一抗原結(jié)合部分包含結(jié)合pdl1的單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體；和ii)第二抗原結(jié)合部分，該第二抗原結(jié)合部分包含結(jié)合vegf的抗vegf抗體。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包括vhh。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體或vhh包含重鏈可變區(qū)(vh)。

3、在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體以1×10-7m或更低的kd結(jié)合pdl1。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體以5×10-8m或更低的kd結(jié)合pdl1。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體以1×10-8m或更低的kd結(jié)合pdl1。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體以約1×10-10m至約5×10-8m之間的kd結(jié)合pdl1。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包括vhh。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體或vhh包含重鏈可變區(qū)(vh)。

4、在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體與參考抗pdl1單結(jié)構(gòu)域抗體交叉競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合pdl1，該參考抗pdl1單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包括：a)含有seq?id?no:1所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:2所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:3所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；b)含有seq?id?no:6所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:7所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?idno:8所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；c)含有seq?id?no:11所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:12所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:13所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；d)含有seq?id?no:16所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:17所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:18所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；e)含有seq?id?no:21所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?idno:22所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:23所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；f)含有seq?id?no:26所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:27所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:28所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；g)含有seq?id?no:31所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:32所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:33所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；h)含有seq?idno:36所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:37所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:38所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；i)含有seq?id?no:41所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:42所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:43所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；j)含有seq?id?no:46所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:47所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?idno:48所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；k)含有seq?id?no:51所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:52所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:53所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；l)含有seq?id?no:56所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:57所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:58所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；m)含有seq?id?no:61所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seqid?no:62所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:63所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3；或n)含有seq?id?no:66所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:67所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:68所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。

5、在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包括：a)重鏈可變區(qū)cdr1，該cdr1包含seq?id?no:1、6、11、16、21、26、31、36、41、46、51、56、61或66中任一者的氨基酸序列，或其包含至多約3個(gè)氨基酸取代的變體；b)重鏈可變區(qū)cdr2，該cdr2包含seqid?no:2、7、12、17、22、27、32、37、42、47、52、57、62或67中任一者的氨基酸序列，或其包含至多約3個(gè)氨基酸取代的變體；和c)重鏈可變區(qū)cdr3，該cdr3包含seq?id?no:3、8、13、18、23、28、33、38、43、48、53、58、63或68中任一者的氨基酸序列，或其包含至多約3個(gè)氨基酸取代的變體。

6、在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包括cdr1結(jié)構(gòu)域、cdr2結(jié)構(gòu)域和cdr3結(jié)構(gòu)域，其中該cdr1結(jié)構(gòu)域、該cdr2結(jié)構(gòu)域和該cdr3結(jié)構(gòu)域分別包括參考重鏈可變區(qū)中包括的cdr1結(jié)構(gòu)域、cdr2結(jié)構(gòu)域和cdr3結(jié)構(gòu)域，該參考重鏈可變區(qū)包含選自由seq?id?no:4、9、14、19、24、29、34、39、44、49、54、59、64或69組成的組的氨基酸序列。

7、在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:1所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:2所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:3所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:6所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:7所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:8所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:11所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:12所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:13所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:16所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:17所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:18所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:21所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:22所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seqid?no:23所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:26所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:27所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:28所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:31所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?idno:32所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:33所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:36所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:37所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:38所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:41所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:42所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:43所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:46所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:47所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:48所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?idno:51所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:52所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:53所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:56所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:57所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:58所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:61所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:62所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:63所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含：含有seq?id?no:66所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr1、含有seq?id?no:67所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr2和含有seq?id?no:68所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)cdr3。

8、在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含與選自由seq?id?no:4、9、14、19、24、29、34、39、44、49、54、59、64或69組成的組的氨基酸序列具有至少約90％序列同一性的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:4所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:9所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:14所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:19所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:24所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:29所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:34所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:39所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:44所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:49所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:54所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:59所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:64所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:69所示的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體包含人源化框架。

9、在某些實(shí)施方案中，該第二抗原結(jié)合部分包含與參考抗vegf抗體交叉競(jìng)爭(zhēng)的抗vegf抗體，該參考抗vegf抗體包含重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，該重鏈可變區(qū)包含：(1)包含seq?id?no:71所示氨基酸序列的cdr-h1，(2)包含seq?id?no:72所示氨基酸序列的cdr-h2，和(3)包含seq?id?no:73所示氨基酸序列的cdr-h3；該輕鏈可變區(qū)包含：(1)包含seq?id?no:74所示氨基酸序列的cdr-l1，(2)包含seq?id?no:75所示氨基酸序列的cdr-l2，和(3)包含seq?id?no:76所示氨基酸序列的cdr-l3。在某些實(shí)施方案中，該第二抗原結(jié)合部分包含重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:77所示的氨基酸序列，該輕鏈可變區(qū)包含seq?id?no:78所示的氨基酸序列。

10、在某些實(shí)施方案中，該抗vegf抗體包括人源化抗體。在某些實(shí)施方案中，該第二抗原結(jié)合部分包含抗vegf抗體，該抗vegf抗體包含兩條抗體重鏈和兩條抗體輕鏈。在某些實(shí)施方案中，該第一抗原結(jié)合部分包含一種或多種抗pdl1抗體。在某些實(shí)施方案中，該第一抗原結(jié)合部分包含兩種抗pdl1抗體。

11、在某些實(shí)施方案中，兩條抗vegf輕鏈中至少一條的c末端與該第一抗原結(jié)合部分的抗pdl1抗體連接。在某些實(shí)施方案中，兩條抗vegf輕鏈中每一條的c末端與該第一抗原結(jié)合部分的抗pdl1抗體連接。在某些實(shí)施方案中，兩條抗vegf輕鏈中至少一條的n末端與該第一抗原結(jié)合部分的抗pdl1抗體連接。在某些實(shí)施方案中，兩條抗vegf輕鏈中每一條的n末端與該第一抗原結(jié)合部分的抗pdl1抗體連接。在某些實(shí)施方案中，兩條抗vegf重鏈中至少一條的c末端與該第一抗原結(jié)合部分的抗pdl1抗體連接。在某些實(shí)施方案中，兩條抗vegf重鏈中每一條的c末端與該第一抗原結(jié)合部分的抗pdl1抗體連接。在某些實(shí)施方案中，兩條抗vegf重鏈中至少一條的n末端與該第一抗原結(jié)合部分的抗pdl1抗體連接。在某些實(shí)施方案中，兩條抗vegf重鏈中每一條的n末端與該第一抗原結(jié)合部分的抗pdl1抗體連接。

12、在某些實(shí)施方案中，該第一抗原結(jié)合部分經(jīng)由接頭與第二抗原結(jié)合部分連接。在某些實(shí)施方案中，該接頭是肽接頭。

13、在某些實(shí)施方案中，該肽接頭包含約4個(gè)至約30個(gè)氨基酸。在某些實(shí)施方案中，該肽接頭包含選自由seq?id?no:83-125組成的組的氨基酸序列。

14、在某些實(shí)施方案中，該第二抗原結(jié)合部分的抗vegf抗體包含fc區(qū)。在某些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括人fc區(qū)。在某些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括選自由以下項(xiàng)組成的組的fc區(qū)：igg、iga、igd、ige和igm的fc區(qū)。在某些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括選自由以下項(xiàng)組成的組的fc區(qū)：igg1、igg2、igg3和igg4的fc區(qū)。在某些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括igg4?fc區(qū)。在某些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括igg1?fc區(qū)。在某些實(shí)施方案中，igg1?fc區(qū)包含一種或多種增強(qiáng)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(adcc)的突變。在某些實(shí)施方案中，igg1?fc區(qū)包含l235v、f243l、r292p和y300l的突變。在某些實(shí)施方案中，igg1?fc區(qū)包含s239d、a330l和i332e的突變。

15、在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體包括全長(zhǎng)免疫球蛋白、單鏈fv(scfv)片段、fab片段、fab'片段、f(ab')2、fv片段、二硫鍵穩(wěn)定的fv片段(dsfv)、(dsfv)2、vhh、vhh-fc融合體、fv-fc融合體、scfv-fc融合體、scfv-fv融合體、雙抗體、三抗體、四抗體或它們的任何組合。

16、在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體是雙特異性抗體。

17、在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體包含：i)第一抗原結(jié)合部分，該第一抗原結(jié)合部分包含單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體，該單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體包含：含有具有seq?id?no:46所示序列的氨基酸的重鏈可變區(qū)cdr1、含有具有seq?id?no:47所示序列的氨基酸的重鏈可變區(qū)cdr2和含有具有seq?id?no:48所示序列的氨基酸的重鏈可變區(qū)cdr3；和ii)第二抗原結(jié)合部分，該第二抗原結(jié)合部分包含抗vegf抗體，該抗vegf抗體包含重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，該重鏈可變區(qū)包含：(1)包含seq?id?no:71所示氨基酸序列的cdr-h1，(2)包含seq?id?no:72所示氨基酸序列的cdr-h2，和(3)包含seq?id?no:73所示氨基酸序列的cdr-h3；該輕鏈可變區(qū)包含：(1)包含seq?id?no:74所示氨基酸序列的cdr-l1，(2)包含seq?idno:75所示氨基酸序列的cdr-l2，和(3)包含seq?id?no:76所示氨基酸序列的cdr-l3。在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體包含：i)第一抗原結(jié)合部分，該第一抗原結(jié)合部分包含單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體，該單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體包含：含有具有seq?id?no:51所示序列的氨基酸的重鏈可變區(qū)cdr1、含有具有seq?id?no:52所示序列的氨基酸的重鏈可變區(qū)cdr2和含有具有seq?id?no:53所示序列的氨基酸的重鏈可變區(qū)cdr3；和ii)第二抗原結(jié)合部分，該第二抗原結(jié)合部分包含抗vegf抗體，該抗vegf抗體包含重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，該重鏈可變區(qū)包含：(1)包含seq?id?no:71所示氨基酸序列的cdr-h1，(2)包含seq?id?no:72所示氨基酸序列的cdr-h2，和(3)包含seq?id?no:73所示氨基酸序列的cdr-h3；該輕鏈可變區(qū)包含：(1)包含seq?id?no:74所示氨基酸序列的cdr-l1，(2)包含seq?id?no:75所示氨基酸序列的cdr-l2，和(3)包含seq?id?no:76所示氨基酸序列的cdr-l3。

18、在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體包含：i)第一抗原結(jié)合部分，該第一抗原結(jié)合部分包含單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體，該單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體包含含有seq?id?no:49所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和ii)第二抗原結(jié)合部分，該第二抗原結(jié)合部分包含抗vegf抗體，該抗vegf抗體包含重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:77所示的氨基酸序列，該輕鏈可變區(qū)包含seq?id?no:78所示的氨基酸序列。

19、在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體包含：i)第一抗原結(jié)合部分，該第一抗原結(jié)合部分包含單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體，該單結(jié)構(gòu)域抗pdl1抗體包含含有seq?id?no:54所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和ii)第二抗原結(jié)合部分，該第二抗原結(jié)合部分包含抗vegf抗體，該抗vegf抗體包含重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，該重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:77所示的氨基酸序列，該輕鏈可變區(qū)包含seq?id?no:78所示的氨基酸序列。

20、在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體包含：含有seq?id?no:126所示氨基酸序列的第一鏈和含有seq?id?no:127所示氨基酸序列的第二鏈。在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體包含：含有seq?id?no:128所示氨基酸序列的第一鏈和含有seq?id?no:129所示氨基酸序列的第二鏈。在某些實(shí)施方案中，多特異性抗體包含：含有seq?id?no:130所示氨基酸序列的第一鏈和含有seq?id?no:131所示氨基酸序列的第二鏈。

21、本公開提供了免疫綴合物，該免疫綴合物包含與治療劑或標(biāo)記連接的本文公開的任何抗體。在某些實(shí)施方案中，該治療劑是細(xì)胞毒素或放射性同位素。在某些實(shí)施方案中，該標(biāo)記選自由以下項(xiàng)組成的組：放射性同位素、熒光染料和酶。

22、本公開提供了抗原識(shí)別受體，該抗原識(shí)別受體包含胞外抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，該胞外抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含本文公開的抗體。在某些實(shí)施方案中，該抗原識(shí)別受體是嵌合抗原受體(car)或重組t細(xì)胞受體。在某些實(shí)施方案中，該抗原識(shí)別受體是car。在某些實(shí)施方案中，包含在胞外抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域中的抗體包括vhh。

23、本公開提供了免疫應(yīng)答細(xì)胞，該免疫應(yīng)答細(xì)胞包含本文公開的抗原識(shí)別受體。在某些實(shí)施方案中，該免疫應(yīng)答細(xì)胞選自由以下項(xiàng)組成的組：t細(xì)胞、自然殺傷(nk)細(xì)胞、細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞(ctl)、調(diào)節(jié)性t細(xì)胞、自然殺傷t(nkt)細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，該免疫應(yīng)答細(xì)胞是t細(xì)胞。

24、本公開提供了藥物組合物，該藥物組合物包含a)本文公開的任何抗體、本文公開的任何免疫綴合物或本文公開的任何免疫應(yīng)答細(xì)胞，和b)藥學(xué)上可接受的載劑。

25、本公開還提供了編碼本文公開的任何抗體的一種或多種核酸、包含本文公開的任何核酸的一種或多種載體和包含本文公開的任何核酸或載體的宿主細(xì)胞。

26、本公開提供了制備本文公開的抗體的方法，該方法包括在本文公開的宿主細(xì)胞中表達(dá)該抗體并從該宿主細(xì)胞中分離該抗體。

27、本公開還提供了減輕受試者的腫瘤負(fù)荷的方法。在某些實(shí)施方案中，該方法包括向受試者施用有效量的本文公開的抗體、本文公開的免疫綴合物或本文公開的藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，該方法減少腫瘤細(xì)胞的數(shù)量。在某些實(shí)施方案中，該方法減小腫瘤尺寸。在某些實(shí)施方案中，該方法根除受試者的腫瘤。在某些實(shí)施方案中，該腫瘤表現(xiàn)出高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(msi)。在某些實(shí)施方案中，該腫瘤選自由以下項(xiàng)組成的組：間皮瘤、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、胸膜腫瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、食管癌、胃癌、滑膜肉瘤、胸腺癌、子宮內(nèi)膜癌、胃腫瘤、膽管癌、頭頸癌、血液癌和它們的組合。

28、本公開提供了治療和/或預(yù)防癌癥，或延長(zhǎng)患有癌癥的受試者的生存期的方法。在某些實(shí)施方案中，該方法包括向受試者施用有效量的本文公開的抗體、本文公開的免疫綴合物或本文公開的藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，該癌癥表現(xiàn)出高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(msi)。在某些實(shí)施方案中，該癌癥選自由以下項(xiàng)組成的組：間皮瘤、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、胸膜腫瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、食管癌、胃癌、滑膜肉瘤、胸腺癌、子宮內(nèi)膜癌、胃腫瘤、膽管癌、頭頸癌、血液癌和它們的組合。

29、本公開還提供了本文公開的用作藥物的任何抗體和/或藥物組合物。本公開還提供了本文公開的用于治療癌癥的任何抗體和/或藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，該癌癥表現(xiàn)出高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(msi)。在某些實(shí)施方案中，該癌癥選自由以下項(xiàng)組成的組：間皮瘤、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、胸膜腫瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、食管癌、胃癌、滑膜肉瘤、胸腺癌、子宮內(nèi)膜癌、胃腫瘤、膽管癌、頭頸癌、血液癌和它們的組合。

30、本公開提供了試劑盒，該試劑盒包含本文公開的抗體、本文公開的免疫綴合物、本文公開的藥物組合物、本文公開的核酸、本文公開的載體或本文公開的免疫應(yīng)答細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，該試劑盒還包含用于治療和/或預(yù)防贅生物的書面說明書。